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連續(xù)超薄切片-科銳諾生物科技

詢盤留言 |投訴|申領(lǐng)|刪除 產(chǎn)品編號：596473952                    更新時間：2025-04-29
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HE染色流程是什么，很多人都不知道，今天跟著小編一起來學(xué)習(xí)一下，切片的好壞直接影響疾病診斷的及時與準(zhǔn)確性。因此一張高質(zhì)量的HE染色切片，連續(xù)超薄切片，是實(shí)驗(yàn)室必須掌握的技術(shù)之一。HE染色目前在國內(nèi)國外病理診斷上被

廣泛采用，常規(guī)的染色方法。下面一起來看HE染色的基本順序。一般切片的片子應(yīng)在60-70度左右的烤箱中烘烤30分鐘以才可以進(jìn)行染色?？偟膩碚f是一個時間較長的過程。

1.樣品制備

對于貼壁生長細(xì)胞，胰酶消化，調(diào)整細(xì)胞濃度約1×105/ml，滴加于蓋玻片上(置于6孔板中)，培養(yǎng)相應(yīng)時間后，取出細(xì)胞爬片，用PBS 洗滌3次。2.樣品固定 ?95%乙醇固定20min，PBS洗滌2次，每次1min。3.染核 ?蘇mu

素染液染色2-3min，自來水洗滌。4.分色 ?鏡下觀察，若細(xì)胞核染色過深，用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒，自來水洗滌。 ?5.染胞質(zhì) ?浸入伊紅染液染色1min，自來水洗滌。6.封片 ?吹干或自然晾gan細(xì)胞爬片后，中性樹膠封片。

以上六點(diǎn)就是HE染色的基本步驟，大家可以參考一下哦

常見的生物切片，厚度一般在幾微米的程度，這種厚度制作起來比較簡單，除了可以使用自動化的設(shè)備來切片之外，手動操作也能切到這種厚度，而且完夠滿足光學(xué)顯微鏡下觀察的標(biāo)準(zhǔn)。不過在前沿的科研領(lǐng)域里，需要觀察更細(xì)微的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，甚至需要從分子的層面來進(jìn)行研究，這時候就需要用到電子顯微鏡。然而電子顯微鏡也需要更薄的樣品，切片至少要達(dá)到0.1微米的厚度，而這種切片也就被稱為是超薄切片，在很多實(shí)驗(yàn)研究里需要厚度達(dá)到50納米，顯然手I操作是無法達(dá)到這種厚度的。那么在實(shí)驗(yàn)環(huán)境下是怎樣做成這種超薄生物切片的呢?首先是需要進(jìn)行更好的固定，因?yàn)樵谌绱吮〉某叨戎拢坏镜募?xì)胞結(jié)構(gòu)都已經(jīng)被完全破壞，而且其中的細(xì)胞器也都被切開，里面的生物酶會釋放出來，并且在很短的時間內(nèi)使細(xì)胞結(jié)構(gòu)遭到破壞。所以就需要在取得樣品之后盡快進(jìn)行固定，要求在一-分鐘之 內(nèi)完成這項(xiàng)操作，然后再使用對應(yīng)的材料來做透明化以及包埋，接下來還需要配合的切片機(jī)來完成切片的過程，從而達(dá)到理想的厚度。

HE染色是制作切片過程中較為常用的染色方法之一，細(xì)胞核被蘇染成鮮明的藍(lán)色，基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色，粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色，彈力纖維呈亮粉紅色，紅血球呈橘紅色，蛋白性液體呈粉紅色。著況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān)，也隨其生活周期及病理變化而改變。例如，細(xì)胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿，當(dāng)其衰老時或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時，伊紅著色由淺變深。

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